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外泌体荧光标记服务
一、 技术简介
外泌体(Exosome)是指包含了复杂 RNA和蛋白质的膜性膜泡 (30-150nm)，其直径在30-150nm左右。外泌体的形成过程：细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中而形成外泌体。外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中，所有培养的细胞类型也均可分泌外泌体。外泌体目前被视为特异性分泌的膜泡，参与细胞间通讯，物质的运输以及正常生理过程的维持，此外还与疾病的产生有关。
通过对分离的外泌体进行体外荧光标记示踪，可以将荧光标记的外泌体用于功能学研究（细胞共孵育实验或者动物活体成像实验）。目前对于外泌体的标记方法有很多种，主要是通过亲脂性的染料：PKH-67（green）/PKH-26（red），这些染料可以稳定的与外泌体的膜脂质区结合并发出荧光，可以用于外泌体的功能学研究。
二、 实验流程
1 外泌体提取和纯化
2 外泌体浓度测定
3 外泌体荧光标记（PKH67/PKH26染色）
4 荧光外泌体纯化
5 荧光外泌体浓度标记
三、 服务说明及结果
客户提供：外泌体或由我司分离外泌体。
公司提供：染色好的外泌体、基本实验步骤、图片、数据分析结果。
实验周期：5-10个工作日。
服务案例下载：不同剂量的荧光染料对外泌体的标记效率的影响研究
四、 参考文献
1 Adipose Tissue Macrophage-Derived Exosomal miRNAs Can Modulate In Vivo and In Vitro Insulin Sensitivity. Cell 2017 Oct;171 (2): 372-384.e12.
2 Exosomes facilitate therapeutic targeting of oncogenic KRAS in pancreatic cancer, Nature 2017 June volume 546, pages 498–503