腺病毒包装

腺病毒(adenovirus)载体,是以腺病毒为原型进行基因功能改造而成的,无外壳的双链DNA病毒,病毒载体转基因效率高,体外实验通常接近100%的转导效率;可转导不同类型的人组织细胞,不受靶细胞是否为分裂细胞所限;容易制得高滴度病毒载体,在细胞培养物中重组病毒滴度可达1.0E+11PFU/ml;进入细胞内并不整合到宿主细胞基因组,仅瞬间表达,安全性高。

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  • 腺病毒介绍:


    腺病毒(adenovirus)载体,是以腺病毒为原型进行基因功能改造而成的,无外壳的双链DNA病毒,病毒载体转基因效率高,体外实验通常接近100%的转导效率;可转导不同类型的人组织细胞,不受靶细胞是否为分裂细胞所限;容易制得高滴度病毒载体,在细胞培养物中重组病毒滴度可达1.0E+11PFU/ml;进入细胞内并不整合到宿主细胞基因组,仅瞬间表达,安全性高。

    本公司Admax腺病毒包装系统(E1和E3双缺失),该系统是将辅助质粒和穿梭质粒共转HEK293细胞,在细胞内过Cre/loxP重组酶系统发生 重组从而获得目的腺病毒毒。该系统操作简便、重组效率高、获得的病毒产率高(一般大于104vp/cell)、目的基因的表达水平高(因为mCMV启动子比hCMV启动子强若干倍)等优点。


    腺病毒包装及感染示意图:




    腺病毒感染细胞图片:



    常用腺病毒载体:

     

    用途

    元件顺序

    筛选标签

    干扰腺病毒载体

    hU6-MCS-CMV-Puromycin

    Puromycin

    干扰腺病毒载体

    hU6-MCS-CMV-RFP

    RFP

    干扰腺病毒载体

    hU6-MCS-CMV-EGFP

    EGFP

    过表达腺病毒载体

    CMV-MCS

    N/A

    过表达腺病毒载体

    CMV-MCS-3FLAG-SV40-EGFP

    EGFP

    过表达腺病毒载体

    CMV-MCS-3FLAG-SV40-RFP

    RFP

    过表达腺病毒载体

    CMV-MCS-3FLAG-SV40-EGFP-IRES-puromycin

    EGFP、Puromycin

    以上仅列举部分载体信息,此外有多种启动子(如:Ubi、EF1a)和筛选标记(如:cherry、copGFP)可供选择。

     

    腺病毒产品服务流程:


     

     

    相关服务信息:


    1. 腺病毒介导基因表达

    2. 腺病毒介导RNA干扰

    3. 腺病毒介导microRNA表达与抑制

    4. 腺病毒介导基因组编辑


    病毒载体选择:



    慢病毒载体

    腺病毒载体

    腺相关病毒载体

    感染性

    分裂期/不分裂期

    分裂期/不分裂期

    分裂期/不分裂期

    整合性

    随机整合

    不整合

    不整合或安全整合

    基因过表达

    YES

    YES

    YES

    基因干扰

    YES

    YES

    YES

    稳定细胞株

    Yes

    NO

    NO

    载体容量

    ≤5K

    ≤8K

    ≤5K

    表达时间

    2~4天

    1~2天

    1~2

    免疫原性

    组织靶向性

    NO

    NO

    YES

    病毒滴度

    1E+8~1E+9 TU/mL

    1E+11~1E+12 PFU/mL

    1E+11~1E+13 vg/mL