sgRNA文库设计合成构建

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    CRISPR/Cas9系统介导的基因定点编辑技术,可实现由sgRNA指导Cas9核酸酶对靶基因的DNA进行定点修饰,其特异性依赖于sgRNA与靶标位点通过碱基互补配对,并且靶标位点必须含有PAM序列(NGG)。

     

    尽快目前有很多sgRNA设计软件,但实现高通量快速全基因组设计sgRNA的程序不多,宇玫博开发的拥有自主知识产权”高通量sgRNA文库设计软件”,该软件能针对任意物种,任意来源的序列设计sgRNA,可用于构建sgRNA表达载体用于基因组编辑实验,同时可用于设计sgRNA文库。

     

    服务内容:


    1  高通量sgRNA文库设计;

    2  sgRNA文库探针Oligo Pools合成;

        每个pool可以提供12,000 到90,000 不同的oligo序列.

     

    参考文章:


    "Large-scale de novo DNA synthesis: technologies and applications," by Sriram Kosuri and George M. Church, Nature Methods, May, 2014, Vol. 11, No. 5, pp. 499–507.


    "Genetic Screens in Human Cells Using the CRISPR/Cas9 System," by Tim Wang, Jenny J. Wei, David M. Sabatini, and Eric S. Lander, Science, Jan. 3, 2014, Vol. 343, no. 6166, pp. 80-84.


    m, Neville E. Sanjana, Ella Hartenian, Xi Shi, David A. Scott, Tarjei Mikkelson, Dirk Heckl, Benjamin L. Ebert, David E. Root, John G. Doench, Feng Zhang, Science, 3 January 2014, Vol. 343, no. 6166, pp. 84-87.


    "Robust Chemical Preservation of Digital Information on DNA in Silica with Error-Correcting Codes," by Grass, R. N., Heckel, R., Puddu, M., Paunescu, D. and Stark, W. J. (2015). Angew. Chem. Int. Ed., 54: 2552–2555.